【关键词】  荔枝核；,,抗乙肝；,,黄酮类；,,紫外分光光度法　　摘要：目的研究荔枝核抗乙肝成分黄酮类化合物的测定方法。方法紫外分光光度法在510 nm处测定。结果建立了回归方程C（μg/ml） = 2.541 61 + 83.286 26 A, 相关系数r = 0.999 8，平均加标回收率为100.82%（RSD=1.59%）。测定荔枝核抗乙肝成分黄酮类化合物含量为7.13%。结论该方法简便，准确，可用于测定荔枝核抗乙肝成分黄酮类化合物的含量。　　关键词：荔枝核；  抗乙肝；  黄酮类；  紫外分光光度法　　Determination of the Content of Antihepatitis B Consituents in Litchi Seed by Spectrophotometric Method　　Abstract：ObjectiveTo establish a method for the determination of the content of antihepatitis B constituents flavonoids in Litchi Seed.MethodsThe content of anti-hapatitis B consituents flavnoids in Litchi Seed was determined by spectrophtometric method at 510nm. ResultsThe regression equation C（μg/ml） = 2.54161 + 83.28626 A and R = 0.9998 of the relationship between concentration and absorbance were established. The average recovery was 100.82% and RSD was 1.59%. The content of antihepatitis B consituents flavonoids in Litchi Seed was 7.13%. ConclusionThe method is easy and accurate, and can be used for determination of the content of antihepatitis B consituents flavnoids in Litchi Seed.　　Key words：Litchi Seed;   Antihepatitis B;   Flavonoids;   Spectrophometic method    　　荔枝核是无患子科植物荔枝的干燥成熟种子，主要分布在福建、台湾、广西、广东等省。我国古代药典记载荔枝核性温，归肝、肾经, 能祛寒止痛。现代临床实验研究显示荔枝核能够降低血糖、调节血脂和提高抗氧化能力、抑制乙肝病毒的作用［1，2］。徐庆等［3］发现荔枝核中黄酮类化合物具有很好的抑制乙肝病毒表面抗原HBsAg的功效。目前除了少量荔枝核被药用外，大量荔枝核都被遗弃浪费。为了充分利用该资源、变废为宝、研究如何开发荔枝核抗乙肝成分黄酮类化合物很有意义和价值。天然药用植物中黄酮类化合物测定方法主要有紫外可见分光光度法［4］、高效液相色谱法［5］、薄层色谱法［6］等。国内外文献关于荔枝核中黄酮类化合物的测定方法尚未见报道，本文建立了铝盐显色分光光度法测定荔枝核抗乙肝成分黄酮类化合物的方法，并测定荔枝核抗乙肝成分黄酮类化合物的含量。　　1  仪器与材料　　1.1  仪器756MC紫外-可见光分光光度计（上海分析仪器总厂）；WS2-133-74多功能电子恒温水浴锅（广东汕头医疗器械二厂），Explorer－11140电子天平（瑞士OHAUS公司）。　　1.2  材料荔枝核购自中药材公司，产地广西；芦丁对照品来自中国药品生物制品检定所；氯化铝、亚硝酸钠、氢氧化钠（分析纯）；95%乙醇；石油醚；水为蒸馏水。　　2  方法与结果　　2.1  测定方法依据以芦丁为对照品测定荔枝核抗乙肝成分黄酮类化合物的含量，加入铝离子试剂，同时控制适宜pH值，使黄酮类化合物与铝盐形成配合物在可见光区能获得稳定的特征吸收峰。　　2.2  试样品溶液的配制荔枝核打成粉过40目的筛。取一定量的荔枝核粉，加入适量50％ 乙醇浸提。提取液过滤后加入石油醚萃取以除去酯类物质和色素，分液去掉石油醚层得到荔枝核黄酮类化合物的提取溶液。　　2.3  对照品溶液的配制精确称取芦丁标准品10.00 mg, 用50%乙醇溶解后定容50.00ml，配制成芦丁50%乙醇标准溶液（0.200 mg/ml）。　　2.4  检测波长的选择各取试样品溶液和芦丁对照品标准溶液少量，按2．5方法显色后在400~650 nm区间扫描，确定二者在510  nm处均有一强吸收峰(图1~2)，故选择510 nm 为测定波长。　　图1  芦丁标样显色扫描曲线(略)　　2.5  标准曲线的建立精确量取芦丁对照溶液 0.00，1.00，2.00，3.00，4.00，5.00，6.00 ml于25 ml 容量瓶，加水至6 ml。加入5% NaNO2溶液1.00 ml, 混匀后放置6 min；再加入10%  AlCl3溶液1.00 ml，混匀后放置6 min；最后加入4% NaOH溶液10.00 ml显色，加水至刻度。静置15 mins后在510 nm处测定吸光度，以1号瓶为空白。绘制出吸光度-浓度标准曲线（图3）。用最小二乘法求出回归方程为：C（μg/ml） = 2.541 61 + 83.286 26A, 相关系数r = 0.999 8 ,P＜ 0.0001表明芦丁含量在线性范围8.00~48.00 μｇ/ml之间与吸光度呈良好的线性关系。共2页: 1 [2] 下一页